TLC是色譜法中之一,屬于液相色譜,即將吸附劑涂布于玻璃板上(或其它載體上)形成一薄層進(jìn)行色譜分析。
它是分離、提純、鑒定和檢測(cè)微量物質(zhì)的一種方法,具有分離鑒定速度快(30分鐘完成)、簡(jiǎn)易、易于掌握、分離效率高、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn),在農(nóng)業(yè)、化工、醫(yī)藥、衛(wèi)生、食品、環(huán)保等方面有廣泛的應(yīng)用。
但因整個(gè)操作體系是開放的,受外界影響較大,重現(xiàn)性差,故人們通常認(rèn)為TLC是“廉價(jià)易于采用的二等檢測(cè)技術(shù)”即“概略定量”。
原理(吸附薄層層析)
依據(jù):吸附劑對(duì)不同物質(zhì)吸附能力不同;展開劑對(duì)不 同物質(zhì)溶解度不同,通過(guò)展開達(dá)到分離的目的。即混合液點(diǎn)在薄層板上時(shí),吸附劑對(duì)不同物質(zhì)有不同程度的吸附,在用溶劑展開時(shí),因薄層上的毛細(xì)管效應(yīng),溶劑上 升,當(dāng)升到原點(diǎn)時(shí),混合物溶解,溶解后隨著不斷上升的溶劑上移于原點(diǎn)之上,遇到新的吸附劑又被吸附,接著又溶解、解吸,使斑點(diǎn)不斷上移。
而在上升過(guò)程中,由于有的成分吸附得牢些,即上移速度慢些,反之則快些,從而達(dá)到“差速遷移”,當(dāng)展開至一定距離后,就可達(dá)到分離混合物的目的。
斑點(diǎn)上升的高度用Rf表示:
原點(diǎn)至斑點(diǎn)中心的距離
Rf= ----------------------------- 所以Rf≤1
原點(diǎn)至溶劑前沿的距離