甜菜堿測定試劑盒 微量法
產品內容：
提取液：80%甲醇，自備。取 80mL 甲醇，加 20mL 蒸餾水。 試劑一：粉劑 0.4g×4 瓶，4℃保存，臨用前根據用量配制，每瓶加 15mL 蒸餾水，用濃鹽酸調 pH 為 1，攪拌 45min，過濾后用水定容 20mL。 試劑二：yimi，自備。 試劑三：液體 40mL×1 瓶，4℃保存。 試劑四：粉劑×1 瓶，常溫保存。 標準品：粉劑×1 支，4℃保存。臨用前加入 1mL 蒸餾水，即得 10mg/mL 甜菜堿標準液。
產品說明：
甜菜堿是一種廣泛分布于動植物及微生物體內的季銨型水溶性生物堿，是生物體內膽堿的氧化 產物，可以增強免疫力、降血脂、抗氧化、抗腫瘤，并可作為甲基供體，參與促進動物蛋白質和脂 肪代謝、增進食欲、緩和應激、調節(jié)滲透壓、穩(wěn)定維生素等多種生物作用，在化工、醫(yī)藥、食品添 加劑等領域有較廣泛的應用。 甜菜堿在強酸條件下和雷氏鹽發(fā)生反應產生沉淀，沉淀用丙酮溶解形成紅色溶液，在 525nm 處 有特征吸收峰，測定 525nm 處的吸光值，可得樣品的甜菜堿含量。
試驗中所需的儀器和試劑：
臺式離心機、可見分光光度計/酶標儀、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96 孔板、可調式移液槍、研 缽/勻漿器、甲醇、鹽酸、蒸餾水。
操作步驟：
一、粗酶液提取： 取烘干后過 40 目篩的樣品約 0.2g，加 1mL 提取液，置于 60℃提取 30min，期間不斷震蕩。用 鑷子加入約 3mg 試劑四后充分震蕩，10000rpm，25℃，離心 15min，取上清液，于 70℃揮發(fā)甲醇(大 約剩余 0.2mL，務必將甲醇揮發(fā)干凈)，之后用水定容 1mL。
二、測定步驟：
1、 可見分光光度計/酶標儀預熱 30min 以上，調節(jié)波長 525nm，試劑三調零。
2、 將 10mg/mL 甜菜堿標準液依次稀釋為 9、8、7、6、5、4、3、2mg/mL 的標準溶液備用。
注意事項：
1、試劑一配制時 pH 嚴格控制為 1，否則會導致反應不*，配制后 4℃只能穩(wěn)定 48 小時，配 制后盡快使用。
2、試劑二與試劑三對呼吸道有一定的刺激，請做好防護工作。
3、使ΔA 的范圍在標曲范圍內。
4、本試劑盒檢測范圍在：2mg/ml-9mg/ml 之間。
相關文獻：
《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID:
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