蛋白標(biāo)簽有什么作用,實驗時融合標(biāo)簽是否需要切除?
重組蛋白的融合標(biāo)簽是指利用 DNA 體外重組技術(shù),在目的蛋白 N 端或 C 端進(jìn)行融合表達(dá)的特定蛋白、多肽或寡肽標(biāo)簽。重組蛋白通過融合標(biāo)簽與包被在固相基質(zhì)上的特異配基結(jié)合,使重組蛋白定向固定并得以純化,大大簡化了重組蛋白的檢測,同時既能保留天然蛋白的大部分結(jié)構(gòu),又能實現(xiàn)增加溶解度,防降解,促進(jìn)分泌,便于純化等功能。常用的標(biāo)簽有 His、GST、SUMO、Flag 和 Fc 等。若融合標(biāo)簽較小,免疫原性也很弱,一般不需要切除,對蛋白質(zhì)的后續(xù)應(yīng)用和研究不會產(chǎn)生影響,例如 His 標(biāo)簽、Fc 標(biāo)簽。但是有些大標(biāo)簽是需要切除的,例如:Dsb 蛋白、FkpA 蛋白、GST 蛋白、SUMO 標(biāo)簽等。