甜菜堿測(cè)定試劑盒 微量法
產(chǎn)品內(nèi)容：
提取液：80%甲醇，自備。取 80mL 甲醇，加 20mL 蒸餾水。 試劑一：粉劑 0.4g×4 瓶，4℃保存，臨用前根據(jù)用量配制，每瓶加 15mL 蒸餾水，用濃鹽酸調(diào) pH 為 1，攪拌 45min，過(guò)濾后用水定容 20mL。 試劑二：yimi，自備。 試劑三：液體 40mL×1 瓶，4℃保存。 試劑四：粉劑×1 瓶，常溫保存。 標(biāo)準(zhǔn)品：粉劑×1 支，4℃保存。臨用前加入 1mL 蒸餾水，即得 10mg/mL 甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)液。
產(chǎn)品說(shuō)明：
甜菜堿是一種廣泛分布于動(dòng)植物及微生物體內(nèi)的季銨型水溶性生物堿，是生物體內(nèi)膽堿的氧化 產(chǎn)物，可以增強(qiáng)免疫力、降血脂、抗氧化、抗腫瘤，并可作為甲基供體，參與促進(jìn)動(dòng)物蛋白質(zhì)和脂 肪代謝、增進(jìn)食欲、緩和應(yīng)激、調(diào)節(jié)滲透壓、穩(wěn)定維生素等多種生物作用，在化工、醫(yī)藥、食品添 加劑等領(lǐng)域有較廣泛的應(yīng)用。 甜菜堿在強(qiáng)酸條件下和雷氏鹽發(fā)生反應(yīng)產(chǎn)生沉淀，沉淀用丙酮溶解形成紅色溶液，在 525nm 處 有特征吸收峰，測(cè)定 525nm 處的吸光值，可得樣品的甜菜堿含量。
試驗(yàn)中所需的儀器和試劑：
臺(tái)式離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、微量玻璃比色皿/96 孔板、可調(diào)式移液槍、研 缽/勻漿器、甲醇、鹽酸、蒸餾水。
操作步驟：
一、粗酶液提?。?取烘干后過(guò) 40 目篩的樣品約 0.2g，加 1mL 提取液，置于 60℃提取 30min，期間不斷震蕩。用 鑷子加入約 3mg 試劑四后充分震蕩，10000rpm，25℃，離心 15min，取上清液，于 70℃揮發(fā)甲醇(大 約剩余 0.2mL，務(wù)必將甲醇揮發(fā)干凈)，之后用水定容 1mL。
二、測(cè)定步驟：
1、 可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上，調(diào)節(jié)波長(zhǎng) 525nm，試劑三調(diào)零。
2、 將 10mg/mL 甜菜堿標(biāo)準(zhǔn)液依次稀釋為 9、8、7、6、5、4、3、2mg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液備用。
注意事項(xiàng)：
1、試劑一配制時(shí) pH 嚴(yán)格控制為 1，否則會(huì)導(dǎo)致反應(yīng)不*，配制后 4℃只能穩(wěn)定 48 小時(shí)，配 制后盡快使用。
2、試劑二與試劑三對(duì)呼吸道有一定的刺激，請(qǐng)做好防護(hù)工作。
3、使ΔA 的范圍在標(biāo)曲范圍內(nèi)。
4、本試劑盒檢測(cè)范圍在：2mg/ml-9mg/ml 之間。
相關(guān)文獻(xiàn)：
《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影響因子:3.712 PMID:
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